Immunológiai kivizsgálás – Reprofit meddőségi immunológia

Immunológia

Zavarok előfordulhatnak az úgynevezett humorális (antitest) és celluláris immunitásban egyaránt. A pár termékenységét olyan betegségek befolyásolhatják, mint a cöliákia, a pajzsmirigy-működési zavar, antfoszfolipid szindróma, krónikus gyulladásos betegségek stb. Ezek a betegségek rejtve, nyilvánvaló problémák nélkül jelentkezhetnek. De gyulladásos reakciót indítanak el a szervezetben, így megzavarják az immunmechanizmusok egyensúlyát. A terhességhez az úgynevezett immunológiai tolerancia indukálása szükséges, a gyulladás ugyanis káros rá. Ennek az a következménye, hogy a nők nem tudnak teherbe esni, a férfiak pedig nem termelnek megfelelő mennyiségű és minőségű spermiumot. Az immunológiai vizsgálat célja az egyensúlyzavar okának feltárása, majd megfelelő kezelése és helyreállítása. Kellően hosszú és célzott immunológiai kezelés hiányában az IVF kezelés ismétlődő sikertelensége következhet be, a partnerek ingerülté válnak, egészségi állapotuk tovább romolhat.

A női partner vizsgálata

Az immunológia keretein belül a nőknek konkrét problémájuknak megfelelően különböző vizsgálatokat javaslunk.

Milyen vizsgálatok javasoltak sterilitással küzdő meddő nőknek??

A meddő nők nem képesek spontán teherbe esni. Ezért a problémák okát a folyamat legelején, azaz a spermium-petesejt érintkezés fázisában keressük, és kiegészítjük az alapvető immunológiai betegségek vizsgálatával és sejtes immunitási tesztekkel. Figyelünk: Alapparaméterek – szérum immunglobulinszintek, alapsejtszám a vérben, esetleg vérkép és CRP – a gyulladás alapmarkereire fókuszáló vizsgálat. Reproduktív antitestek, azaz spermiumok, petefészkek és zona pellucida (petesejt burok) elleni antitestek – a vizsgálat a reproduktív antigének elleni reakciót figyeli. Antifoszfolipid markerek – olyan véralvadási faktorok elleni antitestek vizsgálati sorozata, amelyek hozzájárulhatnak a mikrorögképződéshez, és ezáltal az embrió gyógyulásához, vagy vetéléshez. Autoantitestek – a nukleáris antigének elleni antitestek (ANA) az autoimmun betegségek általános markerei, az anti TPO pajzsmirigybetegségben, az anti TG pedig cöliákiában fordul elő. AMH (anti-müller hormon) – ennek a hormonnak a mennyisége korrelál az egyedi petefészek-tartalékával. NK sejt aktivitás – A páciens vérét stimuláló ágens-spermiumokkal, trofoblaszt vonallal és nem specifikus erős aktivátorral együtt kultiváljuk, és monitorozzuk a CD69 jel expresszióját az NK és NKT sejtek felszínén. A spermium vagy trofoblaszt stimuláció utáni aktiválási jellemzők magas expressziója a partner/magzati antigénekkel szembeni fokozott citotoxikus reaktivitást jelzi, és befolyásolhatja a fogamzás sikerességét vagy növelheti a vetélés kockázatát. Ezenkívül az NK és NKT sejtek száma a vérben nem lehet túl magas. Citokin termelés – stimuláló ágens-spermiumokkal, trofoblaszt vonallal és nem specifikus erős aktivátorral – együtt tenyésztjük a páciens vérét, és monitorozzuk a citokinek mennyiségét a sejtekben. Az embrioprotektív IL-4 és IL-10 termelése kívánatos, a nagy mennyiségű embriotoxikus IFN-gamma és TNF-alfa a szervezet gyulladást elősegítő hangolódásának jele és a terhesség miatti kockázat.

Milyen vizsgálatokat javasolnak az infertilitással küzdő meddő nőknek?

Ezek a nők teherbe esnek, de nem képesek kihordani és életképes magzatot szülni. Ebben a csoportban alaposabban meg kell vizsgálni, hogy egyáltalán kialakult-e a magzattal szembeni tolerancia, vagy fennáll-e a veszélye annak, hogy a mikrotrombusok eltömítik az ereket. Hasonlóképpen megvizsgálják azokat a nőket is, akik terhesek voltak, de preeclampsia vagy HELP-szindróma alakult ki náluk. Alapparaméterek, pl. immunglobulinok szérumszintje, alapvérsejtszám vagy vérkép, CRP – a gyulladás alapvető markereire fókuszáló vizsgálat. A T sejtek száma - olyan sejtek, amelyek toleranciát indukálnak a magzattal szemben. Antifoszfolipid markerek – olyan véralvadási faktorok elleni antitestek vizsgálati sorozata, amelyek hozzájárulhatnak a mikrorögképződéshez, és ezáltal az embrió növekedéséhez, vagy a magzat elégtelen táplálása miatti vetéléshez. Autoantitestek – a nukleáris antigének elleni antitestek (ANA) az autoimmun betegségek általános markerei, az anti TPO pajzsmirigybetegségben, az anti TG pedig cöliákiában fordul elő. AMH (anti-müller hormon) – ennek a hormonnak a mennyisége korrelál az egyedi petefészek-tartalékával. NK sejt aktivitás – A páciens vérét stimuláló ágens-spermiumokkal, trofoblaszt vonallal és nem specifikus erős aktivátorral együtt kultiváljuk, és monitorozzuk a CD69 jel expresszióját az NK és NKT sejtek felszínén. A spermium vagy trofoblaszt stimuláció utáni aktiválási jellemzők magas expressziója a partner/magzati antigénekkel szembeni fokozott citotoxikus reaktivitást jelzi, és befolyásolhatja a fogamzás sikerességét vagy növelheti a vetélés kockázatát. Ezenkívül az NK és NKT sejtek száma a vérben nem lehet túl magas. Citokin termelés – stimuláló ágens-spermiumokkal, trofoblaszt vonallal és nem specifikus erős aktivátorral – együtt tenyésztjük a páciens vérét, és monitorozzuk a citokinek mennyiségét a sejtekben. Az embrioprotektív IL-4 és IL-10 termelése kívánatos, a nagy mennyiségű embriotoxikus IFN-gamma és TNF-alfa a szervezet gyulladást elősegítő hangolódásának jele és a terhesség miatti kockázat.

Milyen vizsgálatok javasoltak ismétlődő sikertelen IVF ciklusok esetén a nőknél?

Ezeknek a nőknek általában infertilás panelt javaslunk. Figyelembe kell venni, hogy korábban milyen IVF kezelést alkalmaztak, nem fejlődtek-e ki embriók, vagy csak a beültetéskor jelentkezett a probléma. A kérdés átfogó áttekintése részeként elengedhetetlen, hogy a férfi is részt vegyen vizsgálaton. Nála a spermaelemzésre koncentrálunk.

A férfi partner vizsgálata

Az immunológiai laboratóriumban elérhető ejakulátumban lévő spermium minőségének áramlási citometriával történő meghatározására szolgáló módszer. Az ejakulátum citometriás vizsgálata ugyanabból az ejakulátummintából végezhető el, amelyből a spermiogramot készítették. Nincs szükség hozzá külön mintaadásra.

A spermiumok apoptózis vizsgálata

Az apoptózis a sejtek szabályozott halála. Ez egy természetes folyamat, melynek során a spermiumok fokozatos elpusztulása, a DNS fragmentációja és a sejtek felszínén bekövetkező változások következnek be. Az apoptotikus spermiumok nem képesek megtermékenyíteni a petesejteket, de az apoptózis korai szakaszában még mozgékonyak, ezért mikroszkopikusan nehéz megkülönböztetni a valóban élő spermiumoktól. Az apoptotikus és az élő spermiumok aránya határozza meg az ejakulátum minőségét. Az egészséges ejakulátumnak több mint 50%-ának élő spermiumnak és kevesebb, mint 50%-ának apoptotikus spermiumnak szükséges lennie. A petesejtek megtermékenyítésének valószínűsége nő, ha az ejakulátumban magasabb az élő spermiumok aránya. Az apoptotikus spermiumok nagy része fertőzésben, autoimmun betegségben vagy az urogenitális traktus területén patológiás pácienseknél található. Ezért az ismétlődően magas apoptotikus spermiummal rendelkező pácienskenél andrológiai vagy immunológia kezelését javasoljuk. Az apoptotikus spermiumok gyakran sérült akroszómával, töredezett DNS-sel rendelkeznek, kevésbé mozgékonyak, ezért nem alkalmasak IUI és IVF eljárásokra, amelyek során a spermiumnak egyedül kell aktívan behatolnia a petesejtbe.

A spermiumok DNS fragmentációja

A fragmentált DNS-t tartalmazó spermiumok számát citometrikusan határozzuk meg a TUNEL (Terminal deoxynucleotide transferase dUTP Nick End Labeling) módszerrel. A spermium DNS-éhez egy enzim segítségével festéket csatolnak, és megjelölik a sérült DNS-t. A minőségi ejakulátum kevesebb, mint 20% spermiumot tartalmaz fragmentált DNS-sel. Kissé emelt érték a 20-30%. A magas érték pedig a spermiumok több mint 30%-nak fragmentált a DNS-e. Minél több fragmentált DNS-t tartalmazó spermium van a mintában, annál kisebb a valószínűsége a petesejtek sikeres megtermékenyítésének. A DNS-fragmentációs vizsgálat olyan pácienseknél javasolt, akiknél az apoptotikus spermium száma magas, több sikertelen IVF-ciklus után (különösen, ha az embriók fejlődésénél volt probléma), illetve a spermium minőségét befolyásoló betegségben szenvedő pácienseknél.

További vizsgálatok

Elérhető továbbá a spermiumok és a leukociták koncentrációjának citometriás vizsgálata az ejakulátumban, a spermiumok számának meghatározását rossz minőségű akroszómával vagy akroszómális proteinek nélkül. Az akroszóma minősége elengedhetetlen a petesejtek természetes megtermékenyítéséhez. Mikroszkópos vizsgálatot végzünk a spermiumok elleni antitestek jelenlétének meghatározásáról. Az antitestek jelentősen gátolhatják a spermiumok mozgását. A vizsgálat csökkent spermiummotilitású (asthenozoospermia) páciensek számára ajánlott. A férfi meddőség oka lehet az immunrendszer zavara vagy az autoimmunitás is A laboratórium olyan vérvizsgálat is elérhető, amely lehetővé teszi a páciensek celluláris és humorális immunitásának felmérését, valamint tartalmazzák az alapvető autoimmun markereket is.

Meddőségi problémákkal küzdő párok vizsgálata

Arra törekszünk, hogy „összerakjuk a dolgokat”. A sok éven át tartó mártíromságot átélt párok, amikor a vágyott gyermekért próbálkoznak, egy sor vizsgálaton estek át. Az információkat azonban gyakran nem sikerült összerakni és megtalálni a kudarc okát (sok helyen egymástól függetlenül zajlottak a vizsgálatok). Gyakran csak a női partnert kezelték, és a "normospermiás" férfit automatikusan egészségesnek tekintették. Mivel minden vizsgálatot egy laboratóriumban végeznek, és általában a pár együtt érkezik hozzánk, átfogó áttekintést kapunk, így nagyobb az esélye annak, hogy megtaláljuk az okot. Amennyiben a pár más helyen már átesett immunológiai vizsgálaton (beleértve az allergológiát is), akkor célszerű a leleteket elhozni az orvosnak. Az immunológiai vizsgálat az alábbi esetekben javasolt: azoknak a pároknak, akiknek egy év rendszeres védekezés nélküli házasélet után sem sikerült teherbe esni, és akiknél a sterilitás egyéb lehetséges okait kizárták, nőknek két első trimeszteres vagy egy második trimeszteres vetélés után, pároknak két sikertelen IVF ciklus után, olyan párok számára, akiknél már diagnosztizáltak valamilyen immunrendszeri rendellenességgel összefüggő betegséget (pl. autoimmun betegség, onkológiai betegség stb.).

Milyen immunológiai vizsgálatok elérhetőek meddő pároknak?

A vizsgálati panelek úgy lettek létrehozva, hogy megfeleljenek a Cseh Klinikai Immunológiai és Allergológiai Társaság Reproduktív Immunológiai Szekciójának követelményeinek. A vizsgálati csomagok alappanelre vannak, amely alap szűrővizsgálatokat tartalmaznak, és teljes panelre felosztva, amely számos paraméter részletes elemzését tartalmazza, beleértve a funkcionális sejtteszteket is. A betegség típusától függően az orvos megfelelő vizsgálatokat javasol. Ha az alappanelen pozitivitást észlelünk, javasoljuk a megfelelő vizsgálatcsoport hozzáadását. Az immunológiai laboratórium az úgynevezett "reprodukciós csomagok" mellett például teljes allergiavizsgálatot is kínál.